植物細胞培養技術就是為了某種目的在細胞水平上的離體植物細胞或原生質體進行一系列的生物工藝學操作,它包括分離、培養、再生以及一系列相關的操作。下面由植物標本制作廠家來具體闡述一下。
一、植物細胞培養意義:
1)不受地理、季節和氣候條件的限制;
2)節省土地,降低成本,生產周期短,可大大提高經濟效益;
3)可代替整體植株在工廠內連續生產所需產物;
4)可通過添加抑制劑等使生物合成按照人的意志進行;
5)可通過誘變篩選,獲得高產細胞株,并且可以進行特定的生物轉化獲得新的有用物質。
二、培養條件
溫度:培養溫度對植物細胞生長及二次代謝產物生成有重要影響。通常,植物細胞培養采用25℃。
攪拌:在搖瓶實驗中,通常搖床的轉速取90―120r/min。
pH值:通過細胞膜進行的H+離子傳遞對細胞的生育環境、生理活性來說無疑是重要的。在培養過程中,通常pH作為一個重要參數被控制在一定范圍內。植物細胞培養的適宜pH值一般為5―6。
通氣:通氣是細胞液體深層培養重要的物理化學因子。好氣培養系統的通氣與混合及攪拌是相互關聯的。對搖瓶試驗,通常500m1的三角瓶內裝80―200m1的植物細胞培養液較適宜。當然,氣液傳質還與瓶塞的材料有關。試驗表明,從溶氧速率考慮,以棉花塞比較好,微孔硅橡膠塞次之,鋁箔塞***差。
光:光對植物有著特殊的作用。光照射條件不僅通過光照周期、光的質量(即種類、波長)而且通過光照量(光強度)的調節來影響植物細胞的生理特性和培養特性。研究表明,光調節著細胞中的關鍵酶的活性,有時光能大大促進代謝產物的生成,有時卻起著阻害作用。
細胞齡:在培養過程的不同時期,細胞的生理狀況、生長與物質生產能力差異顯著。而且,使用不同細胞齡的種細胞,其后代的生長與物質生產狀況也會大不一樣。通常,使用處于對數生長期后期或穩定期前期的細胞作為接種細胞較合適。
接種量:在植物細胞培養中,接種量也是一個影響因素。在再次培養中,往往取前次培養液的5―20%作為種液,也以接種細胞濕重為基準,其接種濃度為15―50g(濕細胞)/L。由于接種量對細胞產率及二次代謝物質的生產有一定影響,故應根據不同的培養對象通過試驗,確定其接種量。